2024年自考《微生物遺傳學(xué)》第七章考點(diǎn)

第一節(jié) 抗性突變株的篩選

相對(duì)比較容易，只要有10*-6頻率的突變體存在，就容易篩選出來。有一次性篩選法和階梯性篩選法兩種手段。

一、一次性篩選法

指在對(duì)出發(fā)菌株完全致死的環(huán)境中，一次性篩選出少量抗性變異株。噬菌體抗性菌株常用此方法。

二、階梯型篩選法

藥物抗性即抗藥性突變株可在培養(yǎng)基中加入一定量的藥物或?qū)w生長(zhǎng)有抑制作用的物質(zhì)。

1、梯度平板法

2、紙片擴(kuò)散法

第二節(jié) 抗性噬菌體的選育

方法：

1、自然誘變  以噬菌體為篩子，敏感菌株的孢子不經(jīng)任何誘變由其自然突變?yōu)榭剐跃辍?/p>

2、誘發(fā)突變  敏感菌株先經(jīng)誘變因素處理，然后將處理過的孢子液分離在含有高濃度的噬菌體的平板上，經(jīng)誘變后的存活孢子中，如存在抗性變異菌株就能在此平板生長(zhǎng)。

2、抗噬菌體菌株的選育程序

專一性噬菌體的獲得和純化 高效價(jià)噬菌體原液制備 菌株誘發(fā)突變 分離在含有噬菌體的平皿里挑取抗性菌落和搖瓶培養(yǎng)（加噬菌體） 分離到含噬菌體的平皿上挑取抗性菌落 抗性菌落特征性測(cè)試

三、抗性噬菌體的特性研究

1、抗性菌體穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

2、抗性菌株的產(chǎn)量性能（穩(wěn)定，不比原始低太多，與原始持平左右）

抗性表現(xiàn)：1、細(xì)胞結(jié)構(gòu)的改變，防止噬菌體吸附侵入，2、生理代謝改變，噬菌體可以吸附侵入，但不能增殖。  （無論從自然突變或誘發(fā)突變所得到的康噬菌體菌株，在用于生產(chǎn)職之前，均需經(jīng)過反復(fù)驗(yàn)證，才能使用。）

3、真正抗性與溶源性的區(qū)別實(shí)驗(yàn)

經(jīng)選育的菌 （誘導(dǎo)）加敏感菌 出現(xiàn)噬菌斑的是假抗，不出現(xiàn)的是真抗。

四、用于生產(chǎn)的抗性噬菌體應(yīng)具備的條件

1、產(chǎn)量不低于敏感株；2、不帶噬菌體（間接篩選法可以保證原始菌種不帶噬菌體）；3、穩(wěn)定好；4、不是溶源性。  （用過濾器過濾噬菌體和細(xì)菌）

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